Osomatsu-san sigue a la familia Matsuno, donde seis hermanos idénticos —Osomatsu, egocéntrico; Karamatsu, varonil; Choromatsu, la voz de la razón; Ichimatsu, cínico; Juushimatsu, hiperactivo, y Todomatsu, entrañable— tienen más de 20 años y siguen viviendo como NEETs. En lugar de construir una carrera o tomarse en serio la vida adulta, los sextillizos pasan los días en casa, persiguiendo chicas, buscando dinero fácil y convirtiendo la idea más pequeña en un desastre. Incluso los raros momentos en que deciden buscar trabajo suelen acabar en vergüenza, porque sus personalidades chocan con la misma rapidez con la que lo hacen ellos.
La serie presenta esos fracasos como una sucesión de aventuras absurdas, a menudo francamente extrañas. Ya sea que los hermanos intenten mejorar su posición social, sobrevivir a otra entrevista humillante o simplemente salir adelante en un día cualquiera sin acabar a la gresca, cada plan parece desbaratarse de una forma distinta. Lo que mantiene en marcha Osomatsu-san es la fricción constante entre los temperamentos muy distintos de los hermanos y su negativa compartida a madurar, lo que convierte incluso un simple recado en una caótica lucha por la supervivencia.